Caracterización de diferentes regenerantes y genotipos parentales de mutantes de Pisum sativum y Medicago truncatula de simbiosis con Rhizobin

Autor:

Ribalta, Federico

Título:

Caracterización de diferentes regenerantes y genotipos parentales de mutantes de Pisum sativum y Medicago truncatula de simbiosis con Rhizobin

Resumen:

La arveja (Pisum Sativum) posee una variabilidad fenotípica muy importante; sin embargo más allá de estas ventajas, algunos caracteres como la resistencia al estrés biótico y abiótico, la estabilidad de rendimiento y la calidad de sus granos, deben mejorarse. Es así como el equipo de investigación del INRA, Francia, ha trabajado intensamente en el mejoramiento de este cultivo, estudiando diversas fuentes de variabilidad genética tales como la fusión de protoplastos, rescate in vitro de embriones inmaduros, variación somacional, selección in vitro, transgénesis, mutagénesis, etc. A partir de estos nuevos materiales, independientemente de la metodología elegida para el incremento de la variabilidad genética, se debe realizar su caracterización e identificación para lo cual se necesitan métodos eficaces. El objetivo de este trabajo fue el de caracterizar los diversos genotipos y regenerantes de la especie Pisum sativum, así como aquellos de la especie modelo Medicago truncatula, previamente establecidos como material no conforme (segregantes por variación somacional) a través de estudios de citometría de flujo. En este estudio se utilizaron diferentes técnicas de laboratorio como los análisis isoenzimáticos y de osmolaridad del medio de cultivo, previamente puestas a punto en el laboratorio del INRA. Por electroforésis se separaron las proteínas según sus cargas eléctricas y pesos moleculares. Los perfiles isoenzimáticos pusieron de manifiesto la presencia de diferentes formas enzimáticas que varían según genotipos, órganos, estados fisiológicos de la planta y el ambiente. Ocho sistemas isoenzimáticos fueron posteriormente estudiados, y tras una cuidadosa selección, se determinó que solamente dos de ellos fueron capaces de proveer perfiles utilizables para la caracterizción de regenerantes no solo con respecto a los genotipos parentales sino también entre ellos. Estos resultados mostraron diferencias no solo cuantitativas sino también cualitativas. Los resultados obtenidos permitieron mostrar una gama de variaciones espontáneas, no inducidas ni controladas, originadas del cultivo in vitro (variación somacional). Por otro lado, los estudios de la cinética de la osmolaridad del medio de cultivo pusieron en evidencia los intercambios que se produjeron entre las células y su medio en relación a los estados de crecimiento y desarrollo. Estos estudios permitieron poner a punto las condiciones óptimas de cultivo y determinar precozmente la competencia embriogénica de las células in vitro (potencial embriogénico). Los estudios de osmolaridad permitieron por primera vez, mostrar su rol preponderante para el desarrollo de las embriogenésis somática a partir de suspensiones celulares con las especies estudiadas. En conclusión, estos estudios permitieron determinar que tanto los análisis iso-enzimáticos como los estudios de osmolaridad constituyen una herramienta muy importante para la caracterización fiable y reproducible de los regenerantes

Temas:

[ CULTIVO DE LA ARVEJA ] [ PISUM SATIVUM ] [ MEDICAGO TRUNCATULA ] 

Lugar:

La Plata: [2008?]

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